PCR διάγνωση της φυματίωσης

Η φυματίωση είναι μια συγκεκριμένη λοίμωξη, η εστία της μπορεί να είναι στους ανθρώπινους ιστούς εδώ και χρόνια, και στη συνέχεια να εξαπλωθεί σε αρκετούς μήνες. Πρόκειται για μια χρόνια ασθένεια, το βέλτιστο θεραπευτικό σχήμα που είναι δύσκολο να βρεθεί. Ένας από τους λόγους για αυτό είναι μια καθυστερημένη διάγνωση, όταν τα μυκοβακτήρια, που βρίσκονται στο ανθρώπινο σώμα, έχουν ήδη προσαρμοστεί σε πολλά φάρμακα.

Ποιες είναι οι σύγχρονες μέθοδοι διάγνωσης; Διαγνωστικά PCR - τι είναι; Πώς γίνεται αυτή η μελέτη; Σε ποιες περιπτώσεις διαγιγνώσκεται η φυματίωση με αυτή τη μέθοδο και ποια είναι η ουσία της;

Τι είναι το Διαγνωστικό PCR

Αυτή είναι μία από τις πιο σύγχρονες μεθόδους διάγνωσης όχι μόνο ασθενειών, αλλά και η ανίχνευση βιολογικού υλικού. Η διάγνωση της PCR επινοήθηκε σχετικά πρόσφατα. Περίπου 30 χρόνια πριν το 1983, ο Αμερικανός βιοχημικός Carey Banks Mullis πρότεινε ένα περίπλοκο σχέδιο για την αποκατάσταση του βιολογικού υλικού των μικροοργανισμών κατά μήκος ενός μόνο μικρού τμήματος. Χάρη στην ανακάλυψη του, ο επιστήμονας έλαβε το υψηλότερο βραβείο - το βραβείο Νόμπελ.

Ποια είναι η διάγνωση των λοιμώξεων από PCR; Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) είναι η διάγνωση της ανίχνευσης ιικών ασθενειών, με βάση μεθόδους γενετικής μηχανικής. Χρησιμοποιείται ευρέως στην ιατρική μικροβιολογία, ανοσολογία και ιολογία. Η μέθοδος είναι καθολική και βοηθά στη διάγνωση με μια μικρή ποσότητα υλικού. Η ανίχνευση της λοίμωξης μπορεί να είναι κυριολεκτικά στις πρώτες ώρες της μόλυνσης, πολύ πριν εμφανιστούν τα πρώτα συμπτώματα της νόσου.

Η μέθοδος συνίσταται στην απόκτηση ενός υλικού από ένα άρρωστο άτομο δεν είναι πολύ διεγέρτη και θραύσματα γονιδιώματος (σωματίδια DNA), βιοσύνθεση του ακολουθούμενη από τον προσδιορισμό σε ποιο μικροοργανισμό κατηγορία ανήκει το γενετικό υλικό που λαμβάνεται χρησιμοποιώντας τεχνικές μοριακής γενετικής.

Παρά το γεγονός ότι πρόκειται για μια περίπλοκη διαδικασία, απαιτεί πολύ λιγότερο χρόνο από πολλές βιολογικές μεθόδους για την ανίχνευση μολυσματικών παραγόντων. Μέσα σε λίγες μόνο ώρες με τη βοήθεια PCR είναι δυνατόν να ανιχνευθεί ο μικροοργανισμός. Για το λόγο αυτό, δεν χρειάζεται να το απομονώσετε από το περιβάλλον (αίμα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό, πτύελα) και για μεγάλο χρονικό διάστημα να αναπτυχθεί σε τεχνητά θρεπτικά μέσα. Αρκεί να υπάρχει ένα μικρό κομμάτι του κλώνου DNA του μολυσματικού παράγοντα στο υλικό δοκιμής.

Στην καρδιά της αντίδρασης έγκειται η δυνατότητα σε τεχνητές συνθήκες (in vitro) να δημιουργηθεί σύνθεση μορίων νουκλεϊνικών οξέων του αιτιολογικού παράγοντα μόλυνσης.

Τι είναι απαραίτητο για τη διεξαγωγή της PCR;

  1. Οι εκκινητές είναι μέρη του DNA, από τα οποία αρχίζει η βιοσύνθεση ή η δημιουργία.
  2. Νουκλεοτίδια ή σύνθετες ενώσεις που αποτελούν τη βάση ενός μορίου ϋΝΑ ή RNA.
  3. Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι αδύνατη χωρίς την παρουσία πολυμεράσης, η οποία είναι ένα ένζυμο που επιταχύνει την πορεία της PCR.

Φάσεις διάγνωσης PCR

Πώς γίνεται η μοριακή διάγνωση με PCR; Η διαδικασία είναι απλή και παίρνει λίγο χρόνο λαμβάνοντας υπόψη τη συλλογή υλικού.

  1. Πριν από την έναρξη της μελέτης, λαμβάνεται το απαραίτητο βιολογικό υλικό - πρόκειται για βρογχικές πλύσεις, αίμα, γαστρικό περιεχόμενο, πτύελα. Ο τύπος του βιολογικού υλικού εξαρτάται από τον επιδιωκόμενο παθογόνο παράγοντα.
  2. Μετουσίωση ή καταστροφή της αρχικής δομής του DNA, η οποία αποτελείται από δύο αλυσίδες. Η ουσία αυτού του σταδίου - να διαχωριστούν οι δύο έλικες υπό θερμότητα (μέγιστη - 98 ºC, η οποία λειτουργεί όχι περισσότερο από δύο λεπτά).
  3. Στο επόμενο στάδιο της PCR, με τίτλο - ανόπτησης, η θερμοκρασία μειώθηκε μερικούς βαθμούς στον εκκινητή-δεσμευμένο DNA κλώνο.
  4. Επιμήκυνση, στην οποία η σύνθεση των απαραίτητων μορίων συμβαίνει άμεσα.

Ως αποτέλεσμα, μόνον 25-30 τέτοιοι κύκλοι αποκτούν τον επιθυμητό αριθμό αντιγράφων DNA μικροοργανισμών που είναι εύκολο να αναγνωριστούν.

Κάνει διάγνωση της φυματίωσης PCR

Δεν υπάρχει τρόπος για απολύτως όλους τους ανθρώπους με υποψία φυματίωσης να διεξάγουν PCR, δεδομένου ότι η μέθοδος απαιτεί τη διαθεσιμότητα δαπανηρού εξοπλισμού. Δεν μπορούν όλες οι πολιτικές πολυκλινικές να το αγοράσουν. Επιπλέον, συνέβη το γεγονός ότι οι συνήθεις μέθοδοι διάγνωσης της λοίμωξης στις περισσότερες περιπτώσεις δικαιολογούν επίσης τον εαυτό τους.

Αυτά περιλαμβάνουν:

  • μια συνέντευξη ασθενούς, μια αναμνησία,
  • μια εμπεριστατωμένη εξέταση ενός ατόμου.
  • μελέτη με τη χρήση δοκιμασίας φυματίωσης Mantoux.
  • ακτινογραφία ή φθοριογραφία.
  • διάγνωση ηλεκτρονικών υπολογιστών εάν είναι απαραίτητο.
  • μικροβιολογικές μέθοδοι διερεύνησης: μικροσκοπία επιφανειών και βακτηριολογική εξέταση πτυέλων.

Η PCR για τη φυματίωση πραγματοποιείται σε ειδικές περιπτώσεις, όταν είναι δύσκολη η διάγνωση ή δεν είναι δυνατή η διεξαγωγή άλλων οργάνων μεθόδων.

Παρά την πληθώρα των τρόπων διάγνωσης, η συχνότητα της φυματίωσης συνεχίζει να αυξάνεται. Επί του παρόντος, όχι μόνο η ανάπτυξή της, αλλά και άλλα χαρακτηριστικά σημειώνονται:

  • η ασθένεια εμφανίζεται συχνά σε σοβαρή μορφή.
  • ο αριθμός των θανατηφόρων περιπτώσεων αυξάνεται.
  • οι μορφές της νόσου που είναι ανθεκτική στη σύγχρονη χημειοθεραπεία διαγνωρίζονται όλο και περισσότερο.

Η απροθυμία του ίδιου του λαού να υποβληθεί σε εξετάσεις ρουτίνας κάθε χρόνο, η άρνηση εμβολιασμού οδηγεί στη διάδοση της φυματίωσης. Υπό αυτές τις συνθήκες, απαιτούνται ταχείες, ενημερωτικές και αποτελεσματικές ερευνητικές μέθοδοι που θα πρέπει να είναι προσιτές σε παιδιά και ενήλικες. Όλες οι παραπάνω μέθοδοι διάγνωσης είναι πολύ κατώτερες από την PCR.

Οφέλη διάγνωσης της φυματίωσης με PCR

Η μελέτη αυτή, αν και νέα, αποδείχθηκε καλά, ειδικά σε αμφιλεγόμενες περιπτώσεις, όταν είναι αδύνατο να διαγνωσθεί μια διάγνωση για διάφορους λόγους.

Λόγω της PCR είναι πολύ πιο εύκολη η ανίχνευση του DNA του παθογόνου της φυματίωσης στο υλικό δοκιμής.

Τα πλεονεκτήματα της διάγνωσης PCR είναι τα ακόλουθα.

  1. Αυτή είναι μια γρήγορη ανάλυση. Σε ένα μικρό τμήμα του μορίου του DNA μπορεί να καθορίσει τη διάγνωση μέσα σε μόλις λίγες ώρες (περίπου πέντε), το οποίο έχει χρησιμοποιηθεί με επιτυχία σε καταστάσεις έκτακτης ανάγκης, όταν, για παράδειγμα, πριν η λειτουργία είναι απαραίτητη για να καθοριστεί αν ένα άτομο είναι άρρωστο με φυματίωση.
  2. PCR ανάλυση επιτρέπεται μόνο όταν οι άλλες μέθοδοι δεν είναι διαθέσιμες ή που απαγορεύονται (για την ανίχνευση της πνευμονικής φυματίωσης είναι μερικές φορές αναγκαίο να γίνουν αρκετές ακτινογραφίες που θα κάνει μια μεγάλη δόση ακτινοβολίας).
  3. Με τη βοήθεια PCR, πραγματοποιείται μελέτη οποιουδήποτε βιολογικού μέσου για την παρουσία ενός παράγοντα σε αυτό. Για παράδειγμα, μπορείτε να διεξάγετε μια μελέτη του εγκεφαλονωτιαίου υγρού, εάν υπάρχει υποψία φυματιώδους μηνιγγίτιδας.
  4. Η PCR επιτρέπεται να διαγνώσει μολυσματικές ασθένειες στην παιδική ηλικία, καθώς η μέθοδος είναι ασφαλής.
  5. Επιτρέπει την ταυτοποίηση του παθογόνου σε οποιοδήποτε στάδιο της ανάπτυξης της ασθένειας.
  6. Η υψηλή ευαισθησία της PCR επιτρέπει την ανίχνευση του mycobacterium tuberculosis, ακόμη και αν υπάρχουν μόνο λίγοι μικροοργανισμοί στο βιολογικό υλικό.
  7. Είναι καλό να το κάνουμε για να διαγνώσουμε την επανεμφάνιση της νόσου.

Μετά από όλα αυτά, η PCR φαίνεται να είναι σχεδόν ιδανική διαγνωστική μέθοδος, την οποία όλοι θα πρέπει να κάνουν με υποψία φυματίωσης. Αλλά υπάρχουν και μειονεκτήματα εδώ, πρέπει να ληφθούν υπόψη.

Μειονεκτήματα της PCR στη διάγνωση της φυματίωσης

Στην εποχή μας, τέτοια διαγνωστικά είναι πιο σπάνια από την κανονικότητα. Και γι 'αυτό υπάρχουν λόγοι.

  1. Αυτή είναι μια δαπανηρή μέθοδος έρευνας. Σε πολλές κλινικές, ο εξοπλισμός για PCR δεν είναι διαθέσιμος λόγω του υψηλού κόστους του, αλλά στα καταβαλλόμενα εργαστήρια η ανάλυση μπορεί ακόμη να γίνει.
  2. Διενεργήθηκε αμέσως μετά τη θεραπεία ή νεκρών μυκοβακτηρίων ζουν σε μια μικρή ποσότητα μπορεί να εξακολουθούν να είναι παρούσες στο ανθρώπινο σώμα (στο διαγνωστικό αποτέλεσμα PCR είναι θετική), έτσι αυτή τη στιγμή η μέθοδος είναι αναξιόπιστη, δεν έχει νόημα να περάσουν.
  3. Μεταλλάξεις μυκοβακτηριδίων οδηγούν σε αναποτελεσματική PCR - η κανονική αλληλουχία κλώνου DNA δεν μπορεί να συντεθεί.
  4. Είναι απαραίτητο να επιλέξετε το σωστό περιβάλλον για τη μελέτη, λαμβάνεται αίμα μόνο όταν υπάρχει υποψία λοίμωξης (σηψαιμία), δεν υπάρχει καμία ανάγκη να λάβει το φλέγμα, αν τα όργανα αμφιβόλου αξίας της φυματίωσης του νευρικού συστήματος. Σε αυτή την περίπτωση, η PCR δεν μπορεί να ανιχνεύσει τον παθογόνο παράγοντα και η διάγνωση δεν θα είναι ενημερωτική.

Ενδείξεις για την ανίχνευση της φυματίωσης με ανάλυση PCR

Η διάγνωση της φυματίωσης με PCR γίνεται συχνότερα σε αμφιλεγόμενες περιπτώσεις. Πότε στέλνουν οι γιατροί αυτή τη μελέτη;

  1. Εάν είναι δύσκολο να γίνει διάγνωση με τις συνήθεις διαθέσιμες μεθόδους, αλλά υπήρξε επαφή με άρρωστη φυματίωση.
  2. Σε περίπτωση που ένα άτομο δεν μπορεί να παραδοθεί για ανάλυση σε μια κλινική για να υποβληθεί στην συνηθισμένη ρουτίνα έρευνα για τη φυματίωση, είναι ευκολότερο να εξετάσει την PCR όπως πτυέλων για την έρευνα μπορεί να παραδοθεί σε ένα βάζο, και η διάγνωση επιβεβαιώνεται για αρκετές ώρες.
  3. Εάν κάποιος πρόκειται να κάνει κάποια επείγουσα επέμβαση και πρέπει να μάθετε αμέσως αν είναι άρρωστος με φυματίωση.
  4. Εάν είναι απαραίτητο, μια έγκυος γυναίκα εξετάζεται επίσης καλύτερα για τη φυματίωση με PCR, καθώς η μέθοδος είναι ασφαλής.
  5. Έναντι αμοιβής διάγνωση βάση μπορεί να πάρει κανείς από φυματίωση δεν επιβεβαιώθηκε από ένα βακτηριολογικές μεθόδους και ακτινοσκόπηση. Αυτό συμβαίνει όταν η εστίαση στο φως αόρατο να κατευθύνει την εικόνα και το πρόσωπο που κατά το χρόνο της πτυέλων για την ανάλυση απέτυχε να συμμορφωθεί με τις συστάσεις του φράχτη στα δεξιά υλικό. Σε αυτή την περίπτωση, το άτομο ανησυχεί για όλα τα συμπτώματα που είναι χαρακτηριστικά της πνευμονικής φυματίωσης.
  6. Όταν υπάρχουν αμφιβολίες σχετικά με τα αποτελέσματα του τεστ Mantoux.
  7. Είναι προτιμότερο να γίνει διάγνωση της φυματίωσης από τα παιδιά σε παιδιά. Η διαδικασία είναι ασφαλής, δεν δημιουργεί πρόσθετο φορτίο ακτινοβολίας, είναι αποτελεσματική στην ανίχνευση δύσκολων μορφών της νόσου για διάγνωση.

Η έγκαιρη διάγνωση της φυματίωσης - μια δέσμευση για σωστά συνταγογραφούμενη θεραπεία και μείωση της εξάπλωσης της νόσου. Συχνά γνωστές μέθοδοι ταυτοποίησης μιας νόσου δεν είναι πάντοτε αποτελεσματικές. Επομένως, η PCR για σήμερα είναι ένας από τους πιο αξιόπιστους και ασφαλείς τρόπους ανίχνευσης της μόλυνσης στα αρχικά στάδια της ανάπτυξής της.

PCR διάγνωση της φυματίωσης σε παιδιά και ενήλικες

Οι σύγχρονες διαγνωστικές μέθοδοι (PCR, Diaskintest, Quantiferon Test) είναι εξαιρετικά αποτελεσματικές, αλλά στην πράξη, οι μελέτες δεν έχουν δοκιμαστεί. Η διάγνωση της φυματίωσης αποτέλεσε τη βάση για την αναγνώριση των μολυσμένων και άρρωστων ανθρώπων.

Η μέθοδος επέτρεψε τον εντοπισμό πολλών ασθενών, τη μείωση των στατιστικών στοιχείων νοσηρότητας, θνησιμότητας.

Η σπορά στα μυκοβακτηρίδια και η μικροσκοπία των πτυέλων σύμφωνα με το Tsiol-Nelson επιτρέπει τη σωστή διάγνωση της λοίμωξης. Το πρόβλημα είναι η ακριβής λήψη πτύελα απευθείας από τον προσβεβλημένο βρόγχο. Στο υπόβαθρο της διαδικασίας φυματίωσης, επηρεάζεται σημαντικό μέρος του βρογχικού δέντρου. Μετά τον βακτηριακό εμβολιασμό, είναι δυνατόν να διεξαχθεί μια δοκιμή για την ευαισθησία του παθογόνου στο αντιβιοτικό.

Μετά την ανάλυση του αποτελέσματος της διάγνωσης των φθισιατρών, κατέστη σαφές ότι η έλλειψη κατανομής της ράβδου του Koch δεν σημαίνει την απουσία μόλυνσης του σώματος. Ο αιτιολογικός παράγοντας μπορεί να προσδιοριστεί μετά τη δεύτερη, την τρίτη, τέταρτη συλλογή του υλικού.

Οι σύγχρονες διαγνωστικές μέθοδοι (dst, Quantifeter test) αποκαλύπτουν μυκοβακτηρίδια στην ενεργό πορεία της νόσου. Παρουσία μυκοβακτηρίων εντός των λεμφαδένων, με εξωπνευμονικές μορφές των εξετάσεων της νόσου είναι συνήθως αρνητικές.

Η έγκαιρη διάγνωση αποτελεί τη βάση για την πρόληψη σοβαρών επιπλοκών και επικίνδυνων συνεπειών της νόσου.

Σύγχρονες μέθοδοι

Η αντικατάσταση της κλασσικής διαγνωστικής φυματίνης είναι το diaskintest (dst). Σύμφωνα με τους πιο πρόσφατους κανονισμούς, η μελέτη θα πρέπει να αντικαταστήσει την τυποποιημένη δοκιμασία Mantoux, η οποία κατέστησε δυνατή την ταυτοποίηση πολλών περιπτώσεων νοσηρότητας και λοίμωξης μεταξύ του πληθυσμού.

Η ουσία του διασκεδαστή, όπως η διαγνωστική της φυματίνης, υποδηλώνει υποδόρια ένεση πρωτεϊνών παθογόνων φυματίωσης. Σε απόκριση της ένεσης, αναπτύσσεται αντίδραση υπερευαισθησίας με ειδικές αλλαγές στο δέρμα: ερυθρότητα, πυκνότητα, φλύκταινες.

Ένα θετικό αποτέλεσμα ενός διασκεδαστή είναι χαρακτηριστικό για τους ασθενείς με ενεργή πορεία της νόσου. Με λοίμωξη ή αυξημένη αλλεργία, η μελέτη θα είναι αρνητική. Η αρνητική επίδραση του ds μπορεί να είναι το αποτέλεσμα ισχυρής ανοσίας, αλλά με λοίμωξη ενός ατόμου.

Σε σύγκριση με το Mantoux, ο δυσκινητικός είναι ένας πιο καθολικός και ευαίσθητος τρόπος διάγνωσης της φυματίωσης. Η απουσία ανίχνευσης μόλυνσης απαιτεί την εφαρμογή της ταυτόχρονα με τη διάγνωση της φυματίωσης.

Παρά τα αποτελέσματα των κλινικών δοκιμών του ds, οι επιστήμονες επιβεβαιώνουν τη γενική καθολικότητα και ευαισθησία της μεθόδου, η έρευνα δεν μπορεί να θεωρηθεί παγκόσμια διαγνωστική λύση.

Η δοκιμή αναπτύχθηκε από τους ακαδημαϊκούς του ερευνητικού ινστιτούτου Sechenov. Η απουσία αλλεργίας στη χρήση του διασχηματιστή εξηγείται από την υποδόρια εισαγωγή ειδικών ειδών πρωτεϊνών φυματίωσης. Μετά την εισαγωγή τους, μια δερματική αντίδραση αναγνωρίζεται με τη μορφή ερυθρών, σφραγίδων.

Τι είναι ένα τεστ ποσοστίνης

Μια ποσοτικοποιημένη εξέταση αξιολογείται μετά τη λήψη του αίματος του ασθενούς. Ο μηχανισμός δράσης της διαδικασίας είναι να προσδιορισθεί η γάμμα-ιντερφερόνη, η οποία απελευθερώνεται από τα Τ λεμφοκύτταρα μετά από μια συνάντηση με Mycobacterium tuberculosis. Οι δοκιμασίες ορίζουν φυματινικές πρωτεΐνες, οι οποίες περιέχουν όχι μόνο βακτήρια ανθρώπων και βοοειδών. Μια ποσοτικοποιημένη δοκιμή μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για τη διάγνωση της μυκοβακτηρίωσης που προκαλείται από άλλα μυκοβακτηρίδια που σχηματίζουν συγκεκριμένες αλλαγές στην ακτινογραφία. Το αποτέλεσμα της δοκιμής προσδιορίζεται σε διάφορους δοκιμαστικούς σωλήνες, γεγονός που αυξάνει τη διαγνωστική ευαισθησία της μεθόδου.

PCR για τη διάγνωση παιδιατρικής φυματίωσης

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι μια ακριβής αλλά δαπανηρή μέθοδος διάγνωσης της φυματίωσης. Η PCR διεξάγεται μετά από βρογχοσκόπηση.

Ορθολογικά, αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης μετά την λήψη αρνητικών αποτελεσμάτων. Τα αποτελέσματα αξιολογούνται μετά από μία τριπλή καλλιέργεια πτύελου σε μυκοβακτηρίδιο φυματίωσης. Υπό τις ευνοϊκότερες συνθήκες, η ταυτοποίηση του παθογόνου παράγοντα υποδεικνύει μόλυνση. Ο διορισμός της χημειοπροφύλαξης επιτρέπει την αποφυγή της ενεργού διαδικασίας φυματίωσης με την παρουσία ενός ραβδιού του Koch.

Όταν λαμβάνεται ένα στέλεχος μικροοργανισμού, είναι δυνατό να σπείρεται η ευαισθησία του αντιβιοτικού. Ο ορισμός των αντιβιοτικών που μπορεί να καταστρέψει τους μικροοργανισμούς, σας επιτρέπει να αξιολογήσετε ποια φάρμακα για τη θεραπεία της λοίμωξης.

Η PCR στα παιδιά εκτελείται με αρνητικά αποτελέσματα εμβολιασμού, αλλά παρουσία μιας σωληνωτής δοκιμασίας, οπτικοποίηση ακτινολογικών σημείων μόλυνσης, ανίχνευση κλινικών συμπτωμάτων της τρέχουσας μόλυνσης.

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης παρέχει υψηλή ακρίβεια (περίπου 99%). Η μέθοδος βασίζεται στην ενίσχυση των νουκλεϊνικών οξέων. Τα μυκοβακτηρίδια, οι ιοί και άλλοι μικροοργανισμοί έχουν μοναδικές αλληλουχίες νουκλεοτιδίων. Η διάγνωσή τους μας επιτρέπει να εντοπίσουμε τον αιτιολογικό παράγοντα της ασθένειας.

Η ευαισθησία της PCR στα παιδιά είναι μικρότερη από την ευαισθησία των ενηλίκων. Στην πράξη αποκαλύπτονται τα ακόλουθα χαρακτηριστικά της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης σε ένα παιδί:

  1. Ειδικότητα - 80-100%;
  2. Η ευαισθησία είναι 25-80%.

Παρά την υψηλή αξιοπιστία της μεθόδου, η επίτευξη αρνητικού αποτελέσματος δεν σημαίνει ότι δεν υπάρχει φυματίωση στα παιδιά. Πιο ορθολογική χρήση της μεθόδου σε ασθενείς με καταστάσεις ανοσοανεπάρκειας. Κατά τη διάγνωση εξωπνευμονικών μορφών μόλυνσης από φυματίωση.

Τα σφάλματα ερμηνείας καθορίζονται από παραβιάσεις στη συλλογή και προετοιμασία υλικού για τη μελέτη.

Αιτίες αρνητικού αποτελέσματος της PCR στη διάγνωση της φυματίωσης

Κατανομή του οργανισμού Mycobacterium lymphogenous (σε λεμφαγγεία), και αιματογενή (στο αίμα) από καθίζηση παρέχει πολλούς ιστούς, εμφάνιση της εξωπνευμονική μόλυνση εστιών.

Σε περιγεννητικό ορισμό των κέντρων διάσπασης (καταστροφής) στους πνεύμονες δεν υπάρχει ανάγκη εκτέλεσης του ptsr. Στους ενήλικες, με τη χρήση ακτινογραφίας, είναι δυνατόν να προσδιοριστούν οι παραμελημένες μορφές με υψηλό βαθμό βεβαιότητας.

Στην παιδιατρική PCR, η μελέτη χρησιμοποιείται συχνότερα λόγω της λανθάνουσας εντοπισμού των μυκοβακτηρίων εντός των λεμφαδένων, γεγονός που οδηγεί σε αρνητικά αποτελέσματα όταν χρησιμοποιούν άλλες διαγνωστικές μεθόδους. Όταν η βακτηριακή καλλιέργεια είναι επαρκής για την ανίχνευση περίπου 10 μικροοργανισμών. Πρέπει να ληφθεί υπόψη ότι δεν είναι υπεύθυνος για την ενεργό πνευμονική φυματίωση.

Για τη σωστή διάγνωση της PCR, βακτηριακός εμβολιασμός, dst, πρέπει να τηρηθούν οι ακόλουθες απαιτήσεις:

  1. Αποθηκεύστε το υλικό σε στείρες δοκιμαστικές σωλήνες.
  2. Εξαλείψτε την είσοδο άλλων βακτηρίων.
  3. Κατά τη μεταφορά, παρατηρήστε την προσωπική υγιεινή για να εμποδίσετε το βιολογικό υλικό να εισέλθει στο σώμα, το πρόσωπο, στην αναπνευστική οδό.

Αποθηκεύστε το αίμα μαζί με συντηρητικό EDTA. Υπάρχουν μοναδικά χαρακτηριστικά της προετοιμασίας του υλικού για κάθε εργαστηριακή ανάλυση που γνωρίζουν οι ειδικοί.

Καινοτόμες μέθοδοι διάγνωσης

Η έγκαιρη ανίχνευση της λοίμωξης επιτρέπει έγκαιρη χημειοπροφύλαξη, για να αποφευχθεί μια σοβαρή πορεία της νόσου.

Η διάβρωση της κλινικής στην παιδική ηλικία, τα ανεπαρκή αποτελέσματα των δοκιμών, η αναλφάβητη ερμηνεία στην αξιολόγηση των δειγμάτων δεν επιτρέπει την έγκαιρη επαλήθευση της λοίμωξης. Για να αποφευχθεί η νοσηρότητα παιδικής ηλικίας απαιτεί διεξοδική ανάλυση των αποτελεσμάτων με τη δυνατότητα διάγνωσης σε πρώιμο στάδιο.

Ο σύγχρονος τρόπος εργαστηριακής διάγνωσης της φυματίωσης στα παιδιά είναι η ανίχνευση του TAB-TM

Η αντίδραση στον προσδιορισμό ενός δείκτη Τ-κυττάρου στα παιδιά που ονομάζεται "TAB-TM" χαρακτηρίζεται από υψηλή ευαισθησία. Η ουσία της μεθόδου είναι να αναγνωρίσει ένα ειδικό σύμπλεγμα διαφοροποίησης (CD-27), εντοπισμένο στην επιφάνεια των Τ-λεμφοκυττάρων. Μετά την απομόνωση αυτού του παράγοντα, οι κυτοκίνες κηλιδώνονται με κυτταρομετρία.

Η μέθοδος περιγράφεται στη βιβλιογραφία από το 2014. Τα αποτελέσματα των παρατηρήσεων δείχνουν υψηλή ευαισθησία της μεθόδου. Ο ορισμός του TAB-TM είναι μια ρητή μέθοδος για τη διάγνωση της φυματίωσης με εξέταση των πτυέλων.

Η ανάλυση ενός αίματος σε φυματίωση - που δείχνει

Στο αρχικό στάδιο, η λοίμωξη από φυματίωση εμφανίζεται χωρίς ειδικά κλινικά συμπτώματα. Η εργαστηριακή διάγνωση στα παιδιά γίνεται δυνατή όταν πολλαπλασιάζεται η ράβδος του Koch.

Ποια κύτταρα αξιολογούνται στη διαδικασία της φυματίωσης σε εργαστηριακό τεστ αίματος:

  1. Ερυθροκύτταρα - ερυθρά αιμοσφαίρια, υπεύθυνα για τη μεταφορά οξυγόνου στους ιστούς. Με μια εύκολη ροή της πνευμονικής φυματίωσης από την πλευρά του βλαστήματος του ερυθρού αίματος, δεν μπορούν να εντοπιστούν παθολογικές μεταβολές. Η παρουσία μιας καταστροφικής εστίασης προάγει την αιμορραγία με αναιμία του αίματος. Η κατάσταση αναπτύσσεται με φυματιώδη φλεγμονή του εντερικού τοιχώματος. Ο αριθμός των δικτυοερυθροκυττάρων στο υπόβαθρο της παθολογίας αυξάνει περισσότερο από 1%.
  2. Τα λευκοκύτταρα αυξάνονται με οποιαδήποτε μόλυνση. Η λευκοκυττάρωση συνοδεύεται από μετατόπιση του λευκογράμματος προς τα αριστερά. Μία αύξηση στον αριθμό των κατακερματισμένων ουδετεροφίλων μπορεί να ανιχνευθεί στο αρχικό στάδιο. Σε σοβαρή φυματίωση με πυώδη τήξη, καταστάσεις ανοσοανεπάρκειας, παρατηρείται λευκοπενία (μείωση του αριθμού των λευκοκυττάρων του αίματος). Ταυτόχρονα αυξάνεται ο αριθμός των λεμφοκυττάρων (περισσότερο από 20%).
  3. Η ηωσινοφιλία μπορεί να εντοπιστεί στο αρχικό στάδιο. Η κατάσταση συμβαίνει με φυσαλιδώδη διηθήματα διαφόρων οργάνων. Η σοβαρή εξέλιξη της φυματίωσης με αποσύνθεση σε ενήλικες οδηγεί στην πλήρη απουσία ηωσινοφίλων.
  4. Αύξηση των βασεοφίλων.

Η εργαστηριακή ανάλυση για τη φυματίωση δεν είναι ειδική για παιδιά ή ενήλικες. Παρόμοιες αλλαγές είναι χαρακτηριστικές για πολλές βακτηριακές ή ιογενείς λοιμώξεις.

Οι δείκτες αιμογράμματος παρουσιάζουν ενδιαφέρον για τους φτιανοθεραπευτές για τον προσδιορισμό του σταδίου μόλυνσης από τη φυματίωση.

Με ενεργή διήθηση, η λευκοκυττάρωση μπορεί να ανιχνευθεί λόγω της αύξησης του αριθμού των ουδετερόφιλων. Στα κύτταρα εμφανίζεται παθολογική κοκκιότητα, η οποία υποδηλώνει την τοξίκωση του αίματος.

Τα φύλλα αποσύνθεσης οδηγούν σε μείωση του αριθμού των ηωσινοφίλων, των ουδετεροφίλων, των νέων μορφών, των λεμφοκυττάρων. Με τη διάδοση, υπάρχει απόλυτη μονοκυττάρωση. Στο φόντο της απορρόφησης, αυξάνεται ο αριθμός των λεμφοκυττάρων και των ηωσινοφίλων.

Όταν οι εστίες συμπιέζονται, το αιμόγραμμα δεν χαρακτηρίζεται από μεταβολές.

Αναλύσεις στα παιδιά για τη φυματίωση: διάγνωση της φυματίωσης

Για μεγάλο χρονικό διάστημα οι φθισιατρικοί έβαλαν την αντίδραση Mantoux. Τέτοιες αναλύσεις σχετικά με τη φυματίωση επέτρεψαν την ανίχνευση όχι μόνο μιας ενεργού λοίμωξης, αλλά και μόλυνσης. Η ουσία της εξέτασης συνίστατο στην υποδόρια ένεση της φυματίνης - μια ουσία που προκάλεσε αλλεργία του σώματος. Για τη δοκιμή, χρησιμοποιήθηκε ένα υλικό που ελήφθη από το Micobacterium Bovis. Μετά από μια υποδόρια ένεση, παράγεται μια papule που αντανακλά την ανταπόκριση του σώματος στη διείσδυση του mycobacterium:

  1. Κανονική κεφαλή - μέγεθος από 5 έως 16 mm.
  2. Ελλείψει αντίδρασης, αποδυναμωμένη ανοσία, απουσία μυκοβακτηρίου.
  3. Ένα μεγάλο παχύ έντερο είναι η παρουσία βακτηριακών αντιγόνων, που έρχονται σε επαφή με τον φορέα ενός βακίλου του φυματιδίου.

Η μέθοδος δεν θεωρείται αξιόπιστη λόγω του μεγάλου αριθμού ψευδών θετικών αντιδράσεων. Σε περίπτωση αμφιλεγόμενων αποτελεσμάτων, απαιτείται επιβεβαίωση της PCR. Με την έλευση του diaskintest (dst), η κατάσταση έχει αλλάξει. Η συνδυασμένη χρήση των μεθόδων επιτρέπει την επίτευξη πιο αξιόπιστων αποτελεσμάτων.

Κλασικοί «φθισιατρικοί» τρόποι διάγνωσης της φυματίωσης

Οι φθισιολόγοι για τη διάγνωση της φυματίωσης σε παιδιά και ενήλικες χρησιμοποιούν τις ακόλουθες εξετάσεις:

  • Μελέτη της ανωμαλίας του ασθενούς (επαφή με έναν ασθενή ή έναν φορέα βακίλου του φυματιδίου). Ο ορισμός των κοινωνικών παραγόντων κινδύνου συμβάλλει στην υποβολή πιθανών λοιμώξεων.
  • Αξιολόγηση της ευαισθησίας στη φυματίνη (δοκιμασία Mantoux) με PPD φυματίνη σε δόση 5-10 TE. Το αποτέλεσμα αξιολογείται μετά από 48-72 ώρες.
  • Οι εξετάσεις ακτίνων Χ διεξάγονται σε παιδιά και ενήλικες με εικαζόμενη φυματίωση, μια κάμψη δειγμάτων φυματίνης.
  • Η βακτηριολογική σπορά αποτελεί αδιαμφισβήτητη απόδειξη της μόλυνσης που προκλήθηκε από τη φυματίωση μυκοβακτηριδίων. Με σωστή συλλογή πτυέλων, ανίχνευση παράγοντα στη γαστρική πλύση, οι εξετάσεις για φυματίωση μπορούν να θεωρηθούν θετικές. Το ραβδί του Koch βρίσκεται σε πυώδη αποστήματα, λεμφαδένες, ασκητική συλλογή, υπεζωκοτικό εξίδρωμα, ούρα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό.
  • Ο ρυθμός καθίζησης των ερυθροκυττάρων αυξάνεται με οποιαδήποτε μόλυνση, συμπεριλαμβανομένης της φυματίωσης.
  • Η PCR μπορεί να αναγνωρίσει ένα συγκεκριμένο παθογόνο, αλλά η μελέτη είναι δαπανηρή.
  • Ο Diaskintest ορίζει την πνευμονική φυματίωση, αλλά συχνά δίνει αρνητικά αποτελέσματα με εξωπνευμονική λοίμωξη.

Η σύγχρονη διάγνωση της φυματίωσης με τη χρήση ενός συνόλου μεθόδων επιτρέπει να προσδιοριστεί με υψηλό βαθμό αξιοπιστίας το μυκοβακτηρίδιο στο σώμα. Χρησιμοποιώντας τις υπάρχουσες μεθόδους, ανιχνεύεται μια ενεργή διαδικασία ή μια λοίμωξη. Είναι απαραίτητο μόνο να απευθυνθείτε στους ειδικούς εγκαίρως!

Ανάλυση PCR για τη διάγνωση της φυματίωσης

Η ιατρική δεν παραμένει σταθερή και μέχρι σήμερα η πρόοδος στην υγειονομική περίθαλψη μπορεί να διαγνώσει και να θεραπεύσει πολλές παλιότερες ανεξέλεγκτες ασθένειες. Υπάρχουν επίσης τέτοιες ασθένειες που δεν μπορούν να ανιχνευθούν με οπτική επιθεώρηση. Η φυματίωση ήταν πάντα μεταξύ τους. Πρόκειται για μια επικίνδυνη λοιμώδη ασθένεια που επηρεάζει τους πνεύμονες, τις αρθρώσεις και τα οστά και συχνά οδηγεί στο θάνατο ακόμη και στις μέρες μας. Οι μέθοδοι διάγνωσης αυτής της ασθένειας έχουν βελτιωθεί, γεγονός που καθιστά δυνατή την ανίχνευση της νόσου σε προγενέστερα στάδια, όταν είναι θεραπεύσιμη. Μεταξύ αυτών, όχι μόνο η ακτινογραφική εξέταση και η δοκιμή Mantoux, αλλά και η PCR για τη φυματίωση.

Φυματίωση - τι είναι αυτό

Προηγουμένως, η φυματίωση ονομάζεται ξηρή ασθένεια ή κατανάλωση. Πρόκειται για μια βακτηριακή λοίμωξη που συχνά επηρεάζει τους πνεύμονες. Οι εξωπνευμονικές μορφές της - η φυματίωση των οστών και των αρθρώσεων, η μηνιγγίτιδα της φυματίωσης - είναι λιγότερο συχνές σε πιο προχωρημένα στάδια. Ο αιτιολογικός παράγοντας αυτής της μολυσματικής νόσου είναι τα μυκοβακτήρια. Ο μπακίλλος φυματίωσης καλείται επίσης ραβδί του Koch.

Η λοίμωξη από τη φυματίωση είναι πολύ μολυσματική, μεταδίδεται από αερομεταφερόμενα σταγονίδια κατά το βήξιμο και το φτάρνισμα ενός ασθενούς. Η μόνη προστασία έναντι αυτής της νόσου είναι το εμβόλιο που έχει παραδοθεί εγκαίρως. Δεν προστατεύει από τη μόλυνση, αλλά δεν επιτρέπει στο βακίλο που εισέρχεται στο σώμα να προκαλέσει φυματίωση.

Μορφές φυματίωσης

Η νόσος μπορεί να εμφανιστεί τόσο σε ανοιχτή όσο και σε κλειστή μορφή. Οι διαφορές είναι οι εξής:

  • κλειστή μορφή της φυματίωσης είναι ασυμπτωματική. Υπό αυτές τις συνθήκες, Koch κολλήσει στα πτύελα δεν μπορεί να ανιχνευθεί, έτσι ένα μολυσμένο μη επικίνδυνων για το περιβάλλον. Αυτή η ασθένεια είναι συνήθως μικρή απειλή και οι περισσότεροι έχουν μολυνθεί, αλλά υπάρχουν και εξαιρέσεις - σε μία περίπτωση από δέκα κλειστό φυματίωση είναι σε θέση να πάει στο ανοικτό καλούπι?
  • όταν η μορφή είναι ανοικτή στο σάλιο και τα πτύελα του ασθενούς, εντοπίζονται τα μυκοβακτήρια που προκαλούν φυματίωση. Ο μολυσμένος οργανισμός αποτελεί τεράστιο κίνδυνο για την κοινωνία, ακόμη και μεμονωμένα. Κατά κανόνα, πρώτα η νόσος επηρεάζει τους πνεύμονες. Εάν δεν κάνετε τη διάγνωση σε πρώιμο στάδιο, μπορεί να λάβει άλλες μορφές, όπως η φυματίωση των οστών ή των αρθρώσεων.

Η ανοικτή μορφή της φυματίωσης διαγιγνώσκεται με πολλούς τρόπους. Ο ασθενής υποβάλλεται σε φθορογραφική εξέταση ή ακτινογραφία του θώρακα, ανάλυση του βιολογικού του υλικού ή δοκιμή δέρματος του Mantoux. Πρόσφατα, εμφανίστηκε μια άλλη μέθοδος, η οποία θεωρείται όχι λιγότερο αποτελεσματική - η ανάλυση της αλυσωτής αντίδρασης πολυμεράσης (PCR).

Τι σημαίνει PCR;

Στην ιατρική πρακτική, οι μέθοδοι διάγνωσης μιας συγκεκριμένης πάθησης έχουν χρησιμοποιηθεί από καιρό με την ανίχνευση του DNA ή του RNA στο ανθρώπινο σώμα. Αυτό ακριβώς είναι το PCR για τη φυματίωση. Πρόκειται για μια ανάλυση υψηλής ακρίβειας του αίματος ή άλλου βιολογικού υγρού που επιτρέπει την ανίχνευση βακτηρίων με ελάχιστη συγκέντρωση στο επιλεγμένο υλικό, αρκετά από ένα μόνο κύτταρο. Η μελέτη διεξάγεται χρησιμοποιώντας ένα ειδικό ένζυμο πολυμεράσης.

Πλεονεκτήματα

Η PCR είναι μια διαγνωστική μέθοδος που έχει αποδειχθεί ότι είναι η καλύτερη, γι 'αυτό χρησιμοποιείται συχνά, τόσο σε συνδυασμό με άλλες μεθόδους όσο και ανεξάρτητα. Τα πλεονεκτήματά του:

  • μικρότερο χρόνο παραγωγής. Η μελέτη διεξάγεται γρήγορα, σε περίπου 5 ώρες, η παρουσία βακίλου του φυματιδίου στο βιολογικό υγρό του ασθενούς μπορεί να ανιχνευθεί χρησιμοποιώντας PCR. Αυτό ισχύει ιδιαίτερα εάν χρειάζεστε άμεση χειρουργική επέμβαση και προτού να πάρετε μια ακριβή διάγνωση.
  • συμβαίνει ότι άλλες μέθοδοι διάγνωσης αντενδείκνυνται στον ασθενή. Για παράδειγμα, οι ακτίνες Χ δεν μπορούν να γίνουν από όλους. Επιπλέον, η εικόνα δεν μπορεί πάντοτε να διαγνωστεί, ειδικά εάν η ασθένεια βρίσκεται σε πρώιμο στάδιο. Με τη βοήθεια της μεθόδου PCR, το παθογόνο ανιχνεύεται αμέσως.
  • οποιοδήποτε βιολογικό υγρό του ασθενούς είναι κατάλληλο για ανάλυση. ούρα PCR και το σάλιο της φυματίωσης για την ανίχνευση πνευμονική και εξωπνευμονική μορφές. Επίσης, η μελέτη διεξάγεται χρησιμοποιώντας το εγκεφαλονωτιαίο υγρό του ασθενούς για την ανίχνευση φυματιώδους μηνιγγίτιδας.
  • η μέθοδος είναι απολύτως ασφαλής. Για να το διεξάγει, αρκεί να αποκτάται βιολογικό υγρό από το σώμα του ασθενούς. Η διάγνωση της φυματίωσης στα παιδιά σε παιδιά - είναι βολική και αβλαβής, καθώς η φθορολογική εξέταση επιτρέπεται να γίνει μόνο από 18 χρόνια και η δοκιμή Mantoux προκαλεί μερικές φορές παράπλευρες αντιδράσεις.
  • Η PCR είναι ένας εξαιρετικά ευαίσθητος προσδιορισμός. Σας επιτρέπει να αναγνωρίσετε ένα ραβδί Koch με ελάχιστη συγκέντρωση μυκοβακτηριδίων.
  • με τη βοήθεια μιας ειδικής ενζυματικής πολυμεράσης, η νόσος διαγιγνώσκεται σε οποιοδήποτε στάδιο - από νωρίς μέχρι να παραμεληθεί.
  • αυτή η μέθοδος είναι αποτελεσματική στη διάγνωση της υποτροπής της νόσου.
  • αυτή η μέθοδος - μια σημαντική ανακάλυψη στη διατύπωση ακριβών διαγνώσεων στα αρχικά στάδια της νόσου. Αυτό σας επιτρέπει να αρχίσετε τη θεραπεία στο συντομότερο χρονικό διάστημα και να καταστρέψετε τους παθογόνους παράγοντες όταν δεν έχουν ακόμη μόνιμα αρνητικές επιπτώσεις στα όργανα και τα συστήματα του ανθρώπινου σώματος.

Πού πρέπει να γίνει η ανάλυση PCR για τη φυματίωση

Παρά το γεγονός ότι η ανάλυση PCR για τη φυματίωση είναι μια εξαιρετικά αποτελεσματική μέθοδος για τη διάγνωση αυτής της νόσου, χρησιμοποιείται σπάνια μόνος της. Κατά κανόνα, αυτός είναι ένας επιπλέον τρόπος ανίχνευσης της φυματίωσης και χρησιμοποιείται σπάνια. Το γεγονός είναι ότι αυτή η μέθοδος είναι αρκετά ακριβή.

Οι κρατικές κλινικές δεν έχουν την ευκαιρία να αγοράσουν ειδικό εξοπλισμό για ανάλυση PCR και η κυβέρνηση δεν βλέπει κανένα σημείο στη χρηματοδότηση αυτού του άρθρου, καθώς η φυματίωση μπορεί να διαγνωστεί με άλλους τρόπους. Μια τέτοια μελέτη πραγματοποιείται συχνότερα σε ιδιωτικές κλινικές, οι οποίες μπορούν να αγοράσουν τον απαραίτητο εξοπλισμό.

Μειονεκτήματα της μεθόδου

Μια υψηλή τιμή δεν είναι το μόνο μειονέκτημα της PCR. Εκτός από το υψηλό κόστος, η μέθοδος έχει άλλα μειονεκτήματα και ελλείψεις, για παράδειγμα:

  • Η PCR για τη φυματίωση δίνει ένα θετικό αποτέλεσμα ακόμα και μετά τη θεραπεία, καθώς παίρνει νεκρά κύτταρα για ζωντανά βακτήρια, οπότε αυτή η μέθοδος δεν είναι κατάλληλη ως εξέταση ελέγχου του ασθενούς για να επιβεβαιώσει την ανάρρωσή του.
  • οι βακίλοι φυματίωσης μεταλλάσσονται και το DNA τους τροποποιείται, γεγονός που μπορεί να επηρεάσει την αξιοπιστία του αποτελέσματος.
  • μια δοκιμή PCR για τη φυματίωση είναι σπάνια, καθώς η παρουσία βακίλων του Koch σε αυτά τα βιολογικά υγρά είναι εξαιρετικά δύσκολο να ανιχνευθεί. Αυτό είναι δυνατό μόνο στα τελευταία στάδια ή με σηψαιμία. Συνήθως τα πτύελα λαμβάνονται για διάγνωση.

Αξίζει να σημειωθεί ότι το πιο ακριβές αποτέλεσμα προκύπτει από την πρόσληψη των περιεχομένων στο στομάχι του ασθενούς. Εάν υπάρχει υποψία πνευμονικής φυματίωσης, η καλλιέργεια πτυέλων θα είναι ο αποτελεσματικότερος τρόπος διάγνωσης της νόσου. Εάν ο ασθενής έχει εξωπνευμονική μορφή, τότε σε αυτή τη βιόσφαιρα μπορεί να μην υπάρχουν βακτήρια. Για τον προσδιορισμό της φυματίωσης των οστών, των αρθρώσεων κ.λπ. με τη βοήθεια PCR, απαιτείται ένα άλλο βιολογικό υγρό, για παράδειγμα νωτιαίος μυελός.

Πώς γίνεται η PCR για φυματίωση

Όπως περιγράφηκε προηγουμένως, η ουσία της ανάλυσης PCR είναι να αποκαλύψει το DNA του παθογόνου στο βιολογικό υγρό του ασθενούς μέσω αντίδρασης πολυμεράσης. Τα κύρια βήματα της μεθόδου είναι:

  1. Συλλογή βιολογικού υλικού. Η PCR δεν είναι μόνο μια εξέταση αίματος - η βιομάζα που μελετήθηκε μπορεί να είναι σάλιο, ούρα, εγκεφαλονωτιαίο υγρό, βρογχικό υγρό έκπλυσης, περιεχόμενα του στομάχου, πτύελα.
  2. Μετά από αυτό, η βιομάζα εκτίθεται σε υψηλές θερμοκρασίες για να καταστρέψει τη δομή DNA του παθογόνου.
  3. Στη συνέχεια η θερμοκρασία μειώνεται βαθμιαία και ένα αστάρι προσαρτάται στο κατεστραμμένο στοιχείο DNA.
  4. Με βάση τα αποτελέσματα της μοριακής σύνθεσης, η οποία διεξάγεται σε περίπου 30 κύκλους, ανιχνεύεται ή απουσιάζει ένα στέλεχος συγκεκριμένου παθογόνου βακτηριδίου.

Για να πραγματοποιήσετε μια τέτοια ανάλυση, χρειάζεστε καλή χρηματοδότηση, επομένως η PCR δεν εκτελείται πολύ συχνά. Ωστόσο, αυτή η μέθοδος δεν είναι ίση, όταν απαγορεύονται άλλες επιλογές διάγνωσης ή σε περιπτώσεις έκτακτης ανάγκης, όταν δεν υπάρχει χρόνος να περιμένουμε το αποτέλεσμα.

Συνοψίζοντας

Εν κατακλείδι, μπορούμε να καταλήξουμε στα ακόλουθα συμπεράσματα:

  • Η PCR είναι μια ανάλυση υψηλής ακρίβειας που μπορεί να ανιχνεύσει τη φυματίωση λίγες ημέρες μετά τη μόλυνση.
  • αυτή η ανάλυση γίνεται για 3,5 - 5 ώρες, οπότε στην περίπτωση που ο λογαριασμός πηγαίνει για ώρες, είναι αναντικατάστατος.
  • Αυτή είναι μια ασφαλής μέθοδος, η οποία δεν έχει παρενέργειες.
  • χρησιμοποιείται όταν άλλες μέθοδοι διάγνωσης έχουν παρουσιάσει αντικρουόμενα αποτελέσματα ή εάν η χρήση τους αντενδείκνυται.

Παρ 'όλα αυτά, η PCR γίνεται σπάνια, καθώς πρόκειται για δαπανηρή ανάλυση που απαιτεί την εγκατάσταση ειδικού εξοπλισμού. Επιπλέον, δεν είναι πάντα ενημερωτικό, έτσι οι ειδικοί χρησιμοποιούν αυτή τη μέθοδο ανίχνευσης της φυματίωσης, ως πρόσθετη.

Ανάλυση PCR (διάγνωση) φυματίωσης

Η φυματίωση ή η κατανάλωση είναι μία από τις πιο δημοφιλείς μολυσματικές ασθένειες του 21ου αιώνα. Οι αιτιολογικοί παράγοντες είναι ειδικά μικροβεύματα - sticks Koch.

Η ασθένεια απλώνεται όχι μόνο στους πνεύμονες, αλλά στον εγκέφαλο, την πέψη, τις αρθρώσεις ή τη σπονδυλική στήλη, το ουρογεννητικό σύστημα, το δέρμα.

Σύμφωνα με την ΠΟΥ, 10 εκατομμύρια άνθρωποι υποφέρουν από φυματίωση κάθε χρόνο, εκ των οποίων τα 3 εκατομμύρια είναι θανατηφόρα.

Ιδιαίτερα λυπηρή κατάσταση στην επικράτεια των χωρών της ΚΑΚ, υπάρχουν περιοδικά επιδημίες φυματίωσης. Η Ρωσία, το Καζακστάν και η Ουκρανία οδηγούν μια θλιβερή βαθμολογία στην εξάπλωση αυτής της λοίμωξης.

Η μόλυνση μεταδίδεται εύκολα με αερομεταφερόμενα σταγονίδια ή μέσω του πεπτικού συστήματος, επηρεάζει ζωτικά όργανα και είναι επίσης σε θέση να προσαρμοστεί γρήγορα στα πολυμερή φάρμακα και τη χημειοθεραπεία.

Ένας από τους κύριους παράγοντες επιτυχούς θεραπείας για τη φυματίωση είναι η έγκαιρη ανίχνευση λοίμωξης.

Διαγνωστικές μέθοδοι

Η ανθρωπότητα κατέληξε σε μια ποικιλία μεθόδων για την αναγνώριση μιας επικίνδυνης ασθένειας. Η διάγνωση της φυματίωσης διαιρείται σε όργανο και εργαστήριο.

Στην πρώτη περίπτωση, μια εξέταση αίματος για φυματίωση, καθώς και πτύελα, ούρα.

Η δεύτερη ομάδα είναι μια μελέτη που χρησιμοποιεί ακτίνες Χ και ενδοσκόπηση. Οι μεθοδολογικές μέθοδοι διάγνωσης της φυματίωσης, με τη σειρά τους, είναι ακτινοβολία και χειρουργική.

Τύποι μεθόδων ακτινοβολίας για την εύρεση μιας ασθένειας

  • Η φθοριογραφία είναι μια μέθοδος διάγνωσης μιας νόσου που είναι γνωστή σε κάθε πολίτη της ΚΑΚ. Με τη βοήθεια των ακτίνων Χ, εξετάζονται οι πνεύμονες και οι ιλαροί λεμφαδένες.
  • Ακτινογραφία του θώρακα - παρόμοια με τη φθοριογραφία, αλλά μια καλύτερη μέθοδος ανίχνευσης λοίμωξης. Η εικόνα αποκτάται με περισσότερες λεπτομέρειες και σε δύο προβολές, αλλά αυτή η διαδικασία είναι περίπου έξι φορές ακριβότερη. Συνήθως χρησιμοποιείται μετά την εμφάνιση σοβαρών υποψιών για την ασθένεια.
  • Η αξονική τομογραφία εκτελείται ως επιπρόσθετος διαγνωστικός έλεγχος, ο οποίος χρησιμοποιείται και μετά από σοβαρούς λόγους παρουσίας λοίμωξης.

Οι χειρουργικές μέθοδοι διάγνωσης περιλαμβάνουν ενδοσκόπηση των βρόγχων, καθώς και μεσολυτοσκόπηση και θωρακοσκόπηση.

Η πρώτη μέθοδος συνίσταται στην εξέταση του βρογχικού δένδρου των πνευμόνων με τη βοήθεια ενός "καθετήρα" σε αυτό το όργανο. Οι άλλες δύο μέθοδοι καθιστούν δυνατή τη μελέτη του πλευρικού τμήματος του πνεύμονα με τη βοήθεια παρακέντησης του θώρακα.

Και οι τρεις μέθοδοι είναι μια σοβαρή χειρουργική επέμβαση και χρησιμοποιούνται συχνότερα στη διαδικασία της εξέλιξης της νόσου.

Για τις εργαστηριακές έρευνες:

  • Ανάλυση πτυέλων για το βακίλο του φυματιδίου.
  • Μικροσκοπικές μελέτες.
  • PCR διάγνωση της φυματίωσης

Τι είναι η διάγνωση PCR;

Μια από τις πιο τέλειες μεθόδους εργαστηριακής διάγνωσης λοιμώξεων ονομάζεται αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης.

Αυτή η μέθοδος αναπτύχθηκε από τον διάσημο Αμερικανό επιστήμονα Carrie Mullis το 1983, για τον οποίο έλαβε το βραβείο Νόμπελ.

Η ανάλυση PCR είναι η απομόνωση σωματιδίων DNA από δείγματα πτυέλων, αίματος, εγκεφαλονωτιαίου υγρού, κόπρανα κλπ. για την επακόλουθη βιοσύνθεση τους.

Με τη βοήθεια μιας πολύπλοκης μοριακο-γενετικής μελέτης, καθορίζεται η φύση των μικροβίων στο σώμα του ασθενούς.

Υπάρχει μια τέτοια ανάλυση για τη φυματίωση σε διάφορα στάδια:

  • Πρώτον, λαμβάνονται βιολογικά δείγματα. Τα υλικά τοποθετούνται σε ειδικά δοχεία και αποστέλλονται στο εργαστήριο.
  • Στο κέντρο των δοκιμών, οι δοκιμές θερμαίνονται στους 97 βαθμούς. Αυτό καθιστά δυνατή την καταστροφή της δομής του DNA γονιδιώματος των μικροοργανισμών, που αποτελείται από αρκετές αλυσίδες.
  • Η θερμοκρασία μειώνεται ειδικά έτσι ώστε οι εκκινητές (οι συμμετέχοντες στο DNA από τον οποίο αρχίζει η βιοσυνθετική διαδικασία) μπορούν να συνδεθούν με μία αλυσίδα δεοξυριβονουκλεϊνικού οξέος.
  • Μετά από αυτό, πραγματοποιείται η βιοσύνθεση των μορίων που είναι απαραίτητα για την ανίχνευση.

Μετά από 25-30 επαναλαμβανόμενους κύκλους κατά τη διάρκεια των εργαστηριακών εξετάσεων, οι γιατροί είναι σε θέση να αναγνωρίσουν εάν υπάρχουν μολυσματικοί μικροοργανισμοί στο σώμα ή όχι.

Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα

Η PCR για τη φυματίωση είναι η πιο σύγχρονη διαγνωστική τεχνική. Η μέθοδος καθιστά δυνατή την ανίχνευση της λοίμωξης σε οποιοδήποτε στάδιο με μεγάλη εμπιστοσύνη. Πλεονεκτήματα:

  • Ταχύτητα - η μελέτη δεν διαρκεί περισσότερο από πέντε ώρες. Τα αποτελέσματα της δοκιμής για μικροβεύματα φυματίωσης μπορούν να βρεθούν μέσα σε 24 ώρες.
  • Ασφάλεια - η μέθοδος PCR δεν έχει αντενδείξεις που σχετίζονται με την ηλικία.
  • Η επικαιρότητα - αυτή η τεχνική σάς επιτρέπει να εντοπίσετε τη φυματίωση σε εκείνα τα στάδια, όταν η ασθένεια δεν έχει συμπτώματα.
  • Υψηλός βαθμός ακρίβειας - αν υπάρχουν λίγοι μικροοργανισμοί στους προσδιορισμούς, θα βρεθούν με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης. Επίσης, αυτή η τεχνική καθιστά δυνατή την εύκολη αναγνώριση του αιτιολογικού παράγοντα της φυματίωσης.
  • Ευελιξία - η διάγνωση χρησιμοποιείται όχι μόνο για την ανίχνευση της φυματίωσης, αλλά και για άλλες ασθένειες όπως χλαμύδια, γονόρροια κ.λπ.

Παρά τα πολλά πλεονεκτήματα, η χρήση αυτής της τεχνικής στην εγχώρια ιατρική πρακτική είναι η εξαίρεση παρά ο κανόνας. Υπάρχουν πολλοί λόγοι για αυτό.

Τα μειονεκτήματα αυτής της μεθόδου είναι:

  • Υψηλό κόστος εξέτασης.
  • Η μέθοδος δεν είναι κατάλληλη για όσους έχουν υποβληθεί σε θεραπεία, καθώς η παρουσία νεκρών βακτηρίων Koch μπορεί να οδηγήσει σε ψευδώς θετικό αποτέλεσμα.
  • Στην περίπτωση μετάλλαξης μολυσματικών μικροοργανισμών, το γονιδίωμα τους δεν μπορεί να αναγνωριστεί κάνοντας ένα ψευδές συμπέρασμα.
  • Είναι σημαντικό να επιλέξετε το σωστό περιβάλλον ανίχνευσης. Για παράδειγμα, το αποτέλεσμα μιας δοκιμασίας αίματος PCR για φυματίωση (αραίωση) θα είναι αρνητικό εάν το νευρικό σύστημα μολυνθεί.
  • Δεν είναι πάντα εφικτή η εφαρμογή αυτής της μεθόδου σε ασθενείς με διάγνωση πνευμονικής βλάβης.

Επιπλέον, για μια τέτοια ανάλυση, η φυματίωση απαιτεί σύγχρονο εξοπλισμό που το 90% των νοσοκομείων δεν διαθέτει. Στο CIS, μια τέτοια ανάλυση μπορεί να γίνει από ένα δίκτυο κλινικών της Invitro.

Κανόνες υποβολής της ανάλυσης

Οι συστάσεις για ασθενείς που υποβάλλονται σε μια τέτοια δοκιμασία για φυματίωση ποικίλλουν, ανάλογα με τον τύπο της ανάλυσης που λαμβάνουν.

Όταν λαμβάνετε αίμα για PCR, είναι απαραίτητο να αποφύγετε το κάπνισμα μία ώρα πριν από τη διαδικασία, σε δύο - για να αποκλείσετε την πρόσληψη αλκοολούχων ποτών και λιπαρών τροφών.

Συνιστάται επίσης να αποφεύγεται η σωματική άσκηση, είναι επίσης αδύνατο να ληφθούν δείγματα αίματος για φυματίωση με άδειο στομάχι.

Όταν δίνετε μια απόχρωση από την στοματική και ρινική κοιλότητα, δεν μπορείτε να φάτε 2-4 ώρες πριν τη διαδικασία, διαφορετικά δεν θα είναι ενημερωτική. Επίσης, μην πίνετε αλκοόλ.

Για ακριβή μαρτυρία της δοκιμής, απαγορεύεται να καπνίζετε νωρίτερα από μία ώρα πριν από τη διαδικασία. Την παραμονή, αποφύγετε να βουρτσίζετε τα δόντια σας και χρησιμοποιώντας σπρέι και αερολύματα για το στόμα σας.

Εάν υπάρχει υποψία φυματίωσης του ουρογεννητικού συστήματος, ο ασθενής πρέπει να αποκλείσει το σεξ 2-3 ημέρες πριν από την παράδοση, 2-3 ώρες πριν από τη διαδικασία, μην πάτε στην τουαλέτα "με μικρό τρόπο". Τα σεξουαλικά όργανα πρέπει να πλένονται με συνηθισμένο νερό χωρίς ειδικά μέσα.

Οι γυναίκες συνιστάται να μην χρησιμοποιούν κολπικά χάπια, κεριά, μπάλες και επίσης να αποφεύγουν τις δοκιμές σε κρίσιμες ημέρες.

5 ημέρες πριν από την παράδοση, το αποτέλεσμα θα πρέπει να εγκαταλειφθεί η διαδικασία της κολποσκόπησης, καθώς και ο υπερφυσικός υπερηχογράφος,

Σε ποιες περιπτώσεις χρησιμοποιείται το PCR;

Μια τέτοια πολύπλοκη διάγνωση έχει την ευκαιρία να μην κάνει κάθε κλινική, αλλά όλο και πιο συχνά οι γιατροί προσφεύγουν σε τέτοιες μεθόδους έρευνας. Συνήθως, αυτές οι δοκιμές εκτελούνται σε ειδικές περιπτώσεις.

  • Σε περίπτωση αμφιλεγόμενων αποτελεσμάτων, μπορεί να χρησιμοποιηθεί εξέταση αίματος για φυματίωση.
  • Σε περιπτώσεις όπου ο ασθενής έρχεται σε επαφή με μολυσμένο άτομο, ο θεράπων ιατρός δεν μπορεί να προσδιορίσει με ακρίβεια τη διάγνωση.
  • Σε περίπτωση επείγουσας χειρουργικής επέμβασης, όταν είναι απαραίτητο να ανακαλύψετε σε σύντομο χρονικό διάστημα εάν ο ασθενής έχει αυτή τη λοίμωξη.
  • Όταν είναι έγκυος σε έναν ασθενή, όταν άλλες μέθοδοι έρευνας δεν είναι επαρκώς ασφαλείς για ένα νεογέννητο μωρό.

Αξίζει να σημειωθεί ότι αυτή η διάγνωση λόγω της αβλαβότητας της συνιστάται στα παιδιά.

Εάν ένας μαθητής έχει αντενδείξεις κατά της δοκιμασίας φυματίωσης, μπορεί να κάνει μια εξέταση αίματος για φυματίωση αντί για μανδύα χρησιμοποιώντας τη μέθοδο PCR.

Διεξαγωγή διαγνωστικών PCR για φυματίωση

Κατά τη διάρκεια των σχολικών ετών, δόθηκε σε όλους η αντίδραση Mantoux για τον προσδιορισμό της φυματίωσης. Η μόλυνση μεταδίδεται από την επαφή των νοικοκυριών και μπορεί να ζήσει σε ανθρώπινους ιστούς για μεγάλο χρονικό διάστημα και να αρχίσει να εξελίσσεται σε λίγους μόνο μήνες. Εκτός από τους ανθρώπους, οι φορείς είναι επίσης έντομα και ζώα. Αργότερα, η ανίχνευση μόλυνσης περιπλέκει τη θεραπεία, επειδή τα βακτηρίδια έχουν ήδη προσαρμοστεί στα φάρμακα. Υπάρχουν διάφοροι τρόποι διάγνωσης της φυματίωσης, αλλά η πιο αξιόπιστη ανάλυση PCR.

Τι είναι η φυματίωση

Στις περισσότερες περιπτώσεις, οι άνθρωποι υποθέτουν ότι η φυματίωση επηρεάζει τους πνεύμονες ενός ατόμου. Η γνώμη είναι εσφαλμένη, δεδομένου ότι η μόλυνση είναι ικανή να επηρεάσει διάφορα όργανα. Η φυματίωση είναι μια κοινή παθολογία. Η διάγνωση της νόσου στα αρχικά στάδια είναι δύσκολη χωρίς ειδικές δοκιμές. Για το λόγο αυτό, η λοίμωξη μπορεί να είναι στο σώμα για χρόνια και όταν τα συμπτώματα εκδηλώνονται, διαγιγνώσκονται τα τελευταία στάδια της παθολογίας. Η φυματίωση των πνευμόνων δεν παρουσιάζει χαρακτηριστική συμπτωματολογία, ιδιαίτερα στα παιδιά. Από την άποψη αυτή, τα σημάδια της παθολογίας συγχέονται συχνά με την ARVI.

Με την καλή λειτουργία του ανοσοποιητικού συστήματος, ο οργανισμός δεν επιτρέπει την εξάπλωση της λοίμωξης. Εάν υπάρχουν παραβιάσεις στην προστατευτική λειτουργία, οι μικροοργανισμοί αρχίζουν να πολλαπλασιάζονται ενεργά. Η φυματίωση λαμβάνει χώρα σε δύο μορφές: κλειστή και ανοιχτή. Οι ασθενείς με την πρώτη μορφή δεν είναι επικίνδυνοι για τους άλλους. Από τους εκπροσώπους της δεύτερης φόρμας είναι δυνατό να πιάσει σε επαφή με το νοικοκυριό (μέσω σάλιο, πράγματα, σκεύη). Σημάδια που χαρακτηρίζουν τη φυματίωση περιλαμβάνουν: αυξημένη κόπωση, αυξημένη εφίδρωση, λευκοκυττάρωση, αναιμία.

Η φυματίωση του πνεύμονα μπορεί να είναι πρωτογενής και δευτερογενής. Το δευτερεύον σύμπλεγμα, κατά κανόνα, εκδηλώνεται λόγω της επιδείνωσης των κύριων εστιών. Μερικές φορές είναι συνέπεια της επανεμφάνισης μετά τη θεραπεία του πρωτεύοντος συμπλέγματος φυματίωσης. Το δευτερογενές σύμπλεγμα χαρακτηρίζεται από λεμφική και βρογχογενή εξάπλωση. Το κύριο σύμπλεγμα φυματίωσης είναι η μορφή της φυματίωσης, στην οποία οι φλεγμονώδεις διεργασίες επηρεάζουν τον πνευμονικό ιστό και τους περιφερειακούς λυμφαδένες.

Το αρχικό σύμπλεγμα αναπτύσσεται μετά την αρχική μόλυνση, πιο συχνά στα παιδιά. Συνήθως το σώμα αντιμετωπίζει τη λοίμωξη χωρίς φαρμακευτική αγωγή. Για το κύριο σύμπλεγμα, τα ακόλουθα σημεία της νόσου είναι χαρακτηριστικά: αύξηση της θερμοκρασίας του σώματος στους 39-40 μοίρες, βίαιος βήχας και πόνος στο στήθος. Το σύμπλεγμα προχωρά παρόμοια με την πνευμονία, με εκτεταμένη βλάβη στους ενδοθωρακικούς λεμφαδένες. Το κύριο σύμπλεγμα είναι πιο συνηθισμένο σε άτομα που βρίσκονται σε άμεση επαφή με ασθενείς με ανοικτή μορφή φυματίωσης

Μέθοδοι διάγνωσης της παθολογίας

Στην ιατρική πρακτική χρησιμοποιούνται διάφορες μέθοδοι διάγνωσης της φυματίωσης. Οι αναλύσεις για τη φυματίωση συμβάλλουν στον εντοπισμό της νόσου ήδη σε πρώιμο στάδιο, όταν δεν υπάρχουν ενδείξεις παθολογίας, γεγονός που διευκολύνει και συντομεύει τη διαδικασία θεραπείας. Μεταξύ των κύριων μεθόδων ανίχνευσης λοίμωξης είναι:

  1. Η αντίδραση Mantoux (αντίδραση στη φυματίνη, δοκιμή φυματίνης) είναι μια δερματική ή ενδοδερμική δοκιμασία που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση μιας συγκεκριμένης απόκρισης του ανοσοποιητικού συστήματος στο παθογόνο. Οι εξετάσεις φυματίωσης που χρησιμοποιούν την αντίδραση Mantoux χρησιμοποιούνται σε συστηματική διαλογή παιδιών, καθώς και σε ενήλικες με υποψία πρωτογενούς σύνθεσης φυματίωσης.
  2. Φθοριογραφία - ακτίνες Χ, η οποία χρησιμοποιείται κυρίως για ενήλικες ασθενείς. Με τη βοήθεια των ακτίνων Χ, ο γιατρός καθορίζει το σκοτάδι στους πνεύμονες. Οι ενήλικες ασθενείς με φθοριογραφία πρέπει να είναι υποχρεωμένοι μία φορά το χρόνο, ορισμένες κατηγορίες πολιτών πιο συχνά.
  3. Τα πτύελα για τη φυματίωση είναι μια ενημερωτική διαγνωστική μέθοδος με υψηλή αξιοπιστία. Δίνουν φλέγμα σύμφωνα με ορισμένους κανόνες, διαφορετικά μπορείτε να πάρετε ένα ψευδές αποτέλεσμα. Για τη μελέτη, θα πρέπει να παραδώσει μια ουσία που βήχει από τους πνεύμονες και όχι από το σάλιο.
  4. Η σπορά στη ΒΚ (Bacillus Koch) είναι μια πολιτιστική μέθοδος έρευνας. Σας επιτρέπει να παρατηρήσετε πόσα μυκοβακτήρια θα αναπτυχθούν σε θρεπτικά μέσα, καθώς και να προσδιορίσετε την ευαισθησία τους στα φάρμακα.
  5. Ουρία σε ΒΚ (Bacillus Koch). Η εξέταση ούρων εξετάζεται για υποψία φυματίωσης του ουρογεννητικού συστήματος.
  6. Η βρογχοσκόπηση (βρογχοσκόπηση) - άμεση μέθοδος περιλαμβάνει την εξέταση του αναπνευστικού συστήματος (τραχεία και τους βρόγχους) χρησιμοποιώντας ένα ειδικό εργαλείο.
  7. Η ELISA (ανοσολογική δοκιμή ενζύμων) είναι μια μελέτη που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση αντισωμάτων στο αίμα σε βακτήρια φυματίωσης. Η ELISA δεν χρησιμοποιείται για την παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας, καθώς τα αντισώματα υπάρχουν στο αίμα ακόμα και μετά την επούλωση.
  8. Η PCR (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης) είναι μια πολύ ακριβής μέθοδος μοριακής γενετικής διάγνωσης που στοχεύει στον προσδιορισμό μολυσματικών και γενετικών παθολογιών σε οξεία και χρόνια στάδια.

Όταν μια συνηθισμένη εξέταση γίνεται πιο συχνά στη χρήση της αντίδρασης Mantoux, ειδικά στα παιδιά. Το δείγμα συχνά δίνει ψευδή αποτελέσματα και δεν έχει υψηλή αξιοπιστία. Ποια μέθοδος θα χρησιμοποιηθεί αντί της αντίδρασης Mantoux καθορίζεται από το γιατρό, βάσει της συγκεκριμένης περίπτωσης.

Ενδείξεις για διάγνωση PCR

Η PCR (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης) είναι μία από τις πιο σύγχρονες μεθόδους διάγνωσης ασθενειών. Η έρευνα χρησιμοποιείται σε μικροβιολογία, ανοσολογία και ιολογία. Ένα χαρακτηριστικό χαρακτηριστικό της τεχνικής είναι η καθολικότητα. Προσδιορίστε τη μόλυνση με αυτή τη μέθοδο μπορεί να είναι στα πρώτα στάδια, όταν τα σημάδια της ασθένειας δεν υπάρχουν. Δεδομένου ότι το υλικό που μελετήθηκε δεν χρησιμοποιείται μόνο το αίμα του ασθενούς, αλλά και ούρα, πτύελα, σάλιο και σπορά διαφόρων μεμβρανών. Η PCR για τη φυματίωση είναι λίγες μόνο ώρες.

Στις περισσότερες περιπτώσεις, η ανάλυση PCR αποστέλλεται για παράδοση με την πολυπλοκότητα της σωστής διάγνωσης. Μην συχνά, αντί για άλλες μελέτες, αλλά σε ένα σύνθετο.

Αυτό είναι δυνατό όταν υπάρχει υποψία πρωτογενούς λοίμωξης, αλλά άλλες μέθοδοι δεν επιτρέπουν την επακριβή επαλήθευση της νόσου. Η χρήση της PCR χρησιμοποιείται όταν ο ασθενής δεν μπορεί προσωπικά να έρθει στο εργαστήριο. Το υλικό δοκιμής (ούρα, πτύελα, σάλιο, σπορά) μπορεί να παραδοθεί από άλλους ανθρώπους. Η σπορά στο σπίτι λαμβάνεται από το ιατρικό προσωπικό.

Η επαλήθευση της φυματίωσης σε παιδιά προτιμάται με PCR. Η ανάλυση δεν βλάπτει το παιδί και είναι εξαιρετικά ακριβής, σε σύγκριση με το δείγμα Mantoux. Για τις έγκυες γυναίκες, είναι καλύτερο να χρησιμοποιήσετε την PCR αντί της ακτινογραφίας, επομένως είναι ασφαλές. Πριν από τη χειρουργική επέμβαση έκτακτης ανάγκης καταφεύγει στην έρευνα, καθώς τα αποτελέσματα είναι έτοιμα όσο το δυνατόν συντομότερα. Μπορείτε να περάσετε από τη διάγνωση μόνοι σας εάν υπάρχουν αμφιβολίες σχετικά με τα αποτελέσματα της εξέτασης Mantoux και της ακτινογραφίας των πνευμόνων.

Οι αναλύσεις για τη φυματίωση ποικίλλουν. Τι είδους και πόσες μελέτες θα χρειαστούν για να καθοριστεί η σωστή διάγνωση καθορίζεται από το γιατρό. Συχνά απαιτείται ένα σύνολο αναλύσεων. Για παράδειγμα, με την ELISA, η αποκωδικοποίηση μπορεί να δώσει ψευδή αποτελέσματα, αφού τα αντισώματα υπάρχουν στο αίμα μετά την επούλωση. Βακτηριολογικές μελέτες των ούρων, του σάλιου και της σποράς, η αντίδραση Mantoux μπορεί να είναι αναξιόπιστη εάν δεν τηρούνται οι κανόνες παρασκευής. Από αυτή την άποψη, η PCR είναι μία από τις πιο ακριβείς μεθόδους διάγνωσης.

Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της διάγνωσης PCR

Παρά την καθολικότητα και το υψηλό πληροφοριακό περιεχόμενο της PCR, η εφαρμογή της δεν είναι καθολικά δυνατή. Η έρευνα απαιτεί ακριβό εξοπλισμό και τα δημόσια νοσοκομεία δεν μπορούν πάντα να το αγοράσουν. Για να παραδώσει τις αναλύσεις στις καταβληθείσες κλινικές δεν έχουν όλοι οι ασθενείς την ευκαιρία. Μεταξύ των πλεονεκτημάτων της PCR μπορεί να σημειωθεί:

  • βραχυπρόθεσμα της έρευνας ·
  • την καθολικότητα των υλικών που μελετήθηκαν (σάλιο, αίμα, ούρα και άλλα).
  • δεν έχει αντενδείξεις, επιτρέπεται να εφαρμόζεται στην εξέταση των παιδιών, συμπεριλαμβανομένης της αντίδρασης Mantoux.
  • επιτρέπει την ταυτοποίηση ασθενειών στα πρώτα στάδια, ακόμη και χωρίς εκδηλώσεις μόλυνσης.
  • έχει υψηλή ευαισθησία. Επιτρέπει την ταυτοποίηση των βακτηρίων ακόμη και με τη μικρή τους ποσότητα στο υπό μελέτη υλικό.
  • Είναι αποτελεσματικό να πραγματοποιείται με την επανειλημμένη εμφάνιση σημείων μόλυνσης.

Παρά τη μεγάλη λίστα των πλεονεκτημάτων, η μέθοδος PCR καθώς και οι άλλες μέθοδοι διάγνωσης της φυματίωσης παρουσιάζουν ορισμένα μειονεκτήματα. Μια λίστα με τον αριθμό των μελετών που μπορούν να μελετηθούν μπορεί να συνδυαστεί ως εξής:

  • υψηλό κόστος ανάλυσης.
  • οι μεταλλάξεις των βακτηρίων μειώνουν την αποτελεσματικότητα της PCR στο μηδέν, καθώς διακόπτεται η αλληλουχία του κλώνου DNA.
  • το υλικό για ανάλυση πρέπει να επιλεγεί σωστά, διαφορετικά η μελέτη δεν θα έχει αποτελεσματικότητα. Για παράδειγμα, αν ο ασθενής έχει φυματίωση του ουρογεννητικού συστήματος και το σάλιο χορηγείται αντί των ούρων, τότε ο παθογόνος παράγοντας δεν θα ανιχνευθεί στην PCR.

Η μέθοδος PCR είναι μια εξαίρεση, όχι μια κανονικότητα. Η έρευνα σχετίζεται με νέες μεθόδους, αλλά έχει αποδειχθεί θετικά. Το μεγάλο πλεονέκτημα της PCR είναι η ευελιξία της, διότι διαφορετικά μέσα (σάλιο, αίμα, ούρα και άλλα) μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως υλικό. Κατά τη διάγνωση της φυματίωσης σε παιδιά, η μέθοδος χρησιμεύει ως μια εξαιρετική εναλλακτική λύση αντί της αντίδρασης Mantoux.

Στις συνθήκες της σύγχρονης εργαστηριακής διάγνωσης, η φυματίωση μπορεί να ανιχνευθεί με διάφορες μεθόδους στα πρώτα στάδια της μόλυνσης τόσο σε παιδιά όσο και σε ενήλικες. Παρά το γεγονός ότι πολλοί γιατροί παρέχουν συμβουλές για την πρόληψη της μόλυνσης με βακτήρια, η συχνότητα εμφάνισης αυξάνεται. Επίσης, η θνησιμότητα από τη φυματίωση αυξάνεται. Κατά την αποκωδικοποίηση, διαπιστώνεται ότι η παθολογία συμβαίνει κάθε χρόνο σε πιο σοβαρές και πολύπλοκες μορφές. Πρώτα απ 'όλα, το σφάλμα έγκειται στους ασθενείς, καθώς δεν χρειάζεται να παραμελούν προληπτικές επισκέψεις στο γιατρό και εξετάσεις. Η έγκαιρη διάγνωση ασθενειών διευκολύνει τη θεραπεία και μειώνει τον κίνδυνο επιπλοκών.

Ανίχνευση της φυματίωσης με PCR

Παρά τα τεράστια επιτεύγματα στον τομέα της ιατρικής, η ανθρωπότητα εξακολουθεί να μην μπορεί να πάρει πλήρως τον έλεγχο μιας τέτοιας επικίνδυνης ασθένειας όπως η φυματίωση. Στην καταπολέμηση αυτής της λοίμωξης οι μέθοδοι διάγνωσης, εμβολιασμού, οι μέθοδοι θεραπείας βελτιώθηκαν. Αλλά η φυματίωση εξακολουθεί να οδηγεί συχνά σε θάνατο. Για να προστατεύσετε τον εαυτό σας από μια φοβερή λοίμωξη, μπορείτε, αν έχετε έναν υγιεινό τρόπο ζωής, να κάνετε εμβολιασμό ρουτίνας και να κάνετε τακτική εξέταση. Πλήρης επούλωση σε περίπτωση λοίμωξης θα βοηθήσει μόνο την έγκαιρη διάγνωση. Η ανάλυση της PCR αίματος για τη φυματίωση επιτρέπει το συντομότερο δυνατόν να αποκαλυφθεί ένα ραβδί του Koch.

Η φυματίωση είναι η λοίμωξη

Η φυματίωση (ένα παρωχημένο όνομα για κατανάλωση) είναι μια λοιμώδης παθολογία που επηρεάζει συχνότερα το αναπνευστικό σύστημα. Το Mycobacterium tuberculosis μεταδίδεται με αερομεταφερόμενα σταγονίδια κατά τη διάρκεια του φτάρνισμα και βήχα ενός μολυσμένου προσώπου ή ζώου. Ο κίνδυνος για τη μόλυνση είναι επίσης το υγρό του σάλιου ενός ασθενή με φυματίωση. Μετά την είσοδο στο σώμα, η παρουσία λοίμωξης συχνά δεν εκδηλώνεται, δηλαδή, η ασθένεια προχωρά σε λανθάνουσα μορφή.

Ανάλογα με την πορεία της νόσου διακρίνονται δύο μορφές μόλυνσης από φυματίωση:

  1. Το κλειστό στάδιο των φθινοθεραπευτών της φυματίωσης ταξινομείται ως χαμηλού κινδύνου ή γενικά δεν είναι επικίνδυνο, από την άποψη της μόλυνσης των άλλων. Τα μυκοβακτηρίδια με λανθάνουσα μορφή στα πτύελα δεν ανιχνεύονται με τις διαθέσιμες διαγνωστικές μεθόδους, μεταξύ άλλων με ανάλυση PCR. Αυτή η κατάσταση είναι επικίνδυνη επειδή σε μία από τις δέκα περιπτώσεις μπορεί να περάσει στην ενεργό φάση, δηλαδή σε μια ανοικτή μορφή φυματίωσης.
  2. Το ανοικτό στάδιο της μόλυνσης από τη φυματίωση χαρακτηρίζεται από την ανίχνευση των ράβδων του Koch στα πτυέια και σε άλλα σωματικά υγρά. Με αυτή τη μορφή της νόσου, ο ασθενής είναι εξαιρετικά επικίνδυνος για τους ανθρώπους γύρω του, ακόμη και αν τηρούνται τα πρότυπα υγιεινής.

Τα απαιτούμενα διαγνωστικά μέτρα για την ανίχνευση φυματιδιακών μυκοβακτηρίων περιλαμβάνουν φθοριογραφία, τομογραφία και ακτινογραφία θώρακος και άλλα προσβεβλημένα όργανα. Με την επιτυχία των μελετών διαφορετικού βιολογικού υλικού, καθώς και με τη δοκιμή φυματινισμού δέρματος, είναι επίσης η αντίδραση του Mantoux. Αλλά η πιο αποτελεσματική μοριακή γενετική ανάλυση της αλυσωτής αντίδρασης πολυμεράσης, συντομευμένη ως PCR.

Ποιο είναι το τεστ PCR για τη μόλυνση από τη φυματίωση

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι η ακριβέστερη μοριακή γενετική διάγνωση. Η ανάλυση της PCR σε περίπτωση μόλυνσης από φυματίωση επιτρέπει σε κάποιον να αναγνωρίσει με μεγάλη βεβαιότητα την παρουσία DNA ή RNA του παθογόνου στο μελετημένο δείγμα αίματος ή άλλων σωματικών υγρών.

Τα πολυάριθμα πλεονεκτήματα της μεθόδου διαγνωστικής PCR περιλαμβάνουν το γεγονός ότι ένας πολύ μικρός αριθμός βακτηρίων μπορεί να είναι αρκετός για να διεξαγάγει μια μελέτη χρησιμοποιώντας μια ειδική πολυμεράση πολυμεράσης, και αρκεί ένα μόνο κύτταρο.

Άλλα πλεονεκτήματα στην διάγνωση της φυματίωσης μέσω PCR:

  • Η άψογη ακρίβεια της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης στην ανάλυση για μόλυνση από φυματίωση επιτυγχάνεται εξαιτίας ενός ειδικού θραύσματος που σχετίζεται με ένα συγκεκριμένο παθογόνο, στην περίπτωση αυτή μυκοβακτηρίδια φυματίωσης.
  • Η εγγύηση ενός αποτελέσματος 100% λόγω της ευαισθησίας της ανάλυσης PCR, η οποία είναι από δέκα έως χίλια κύτταρα στο δοκιμαστικό δείγμα, σε ένα βιολογικό υλικό είναι πραγματικά δυνατό να ανιχνευθεί ακόμη και ένα μόνο κύτταρο ενός φυματιώδους μυκοβακτηρίου.
  • Η πιο επείγουσα λήψη των αποτελεσμάτων της εξέτασης είναι μόνο εντός 3,5-5,5 ωρών από τον χρόνο της ανάλυσης PCR για mycobacterium tuberculosis.

Η ανάλυση της PCR σε φυματίωση είναι μια καθοριστική πρόοδος στον τομέα της έγκαιρης και ακριβής διάγνωσης. Από την εμφάνιση της μοριακής γενετικής μεθόδου διάγνωσης, έχει καταστεί δυνατό να ανιχνευθεί η φυματίωση και άλλες θανατηφόρες λοιμώξεις το νωρίτερο στάδιο, ημέρες ή λίγες εβδομάδες μετά τη μόλυνση. Όταν παθογόνα αρχίζουν να προσβάλλουν το σώμα, μπορούν ακόμη να καταστραφούν χωρίς συνέπειες για τα όργανα και τα συστήματα του ανθρώπινου σώματος.

Το Mycobacterium tuberculosis έχει ένα χαρακτηριστικό γνώρισμα που περιπλέκει σημαντικά τη θεραπεία αυτής της νόσου - την ικανότητα προσαρμογής στις φαρμακευτικές επιδράσεις ορισμένων φαρμάκων. Η ανάλυση της PCR σε φυματίωση παρέχει την ευκαιρία να διαπιστωθεί η ευαισθησία της φυματίωσης από μυκοβακτηρίδια στο συνταγογραφούμενο φάρμακο και έτσι να διαπιστωθεί η αποτελεσματικότητα της θεραπείας. Κατά τη διεξαγωγή μελέτης PCR για τον προσδιορισμό της αντίστασης της φυματίωσης από μυκοβακτηρίδια στα φάρμακα, χρησιμοποιείται η ικανότητα των γονιδίων του παθογόνου να «θυμάται» την ανοσία σε ένα συγκεκριμένο φάρμακο. Το αποτέλεσμα της γονιδιακής έρευνας σχετικά με την αντοχή στα φάρμακα μπορεί να ληφθεί ήδη δύο ημέρες μετά την υποβολή της ανάλυσης PCR.

Πώς γίνεται η μέθοδος PCR για τη φυματίωση

Η ουσία της διάγνωσης με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης συνίσταται στην απομόνωση από τα βιολογικά υγρά του ασθενούς του ϋΝΑ του αιτιολογικού παράγοντα και στην ταξινόμησή του ως μικροοργανισμού. Για την ανίχνευση του παθογόνου, αρκεί και το μικροσκοπικό θραύσμα της αλυσίδας DNA. Στον μακρύ κατάλογο των πλεονεκτημάτων της ανάλυσης για τη φυματίωση με PCR, μπορείτε να προσθέσετε την απόλυτη απλότητα αυτής της μελέτης.

Στάδια διάγνωσης της φυματίωσης με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης:

  • Ως δείγματα δοκιμής χρησιμοποιούνται ρευστά, πτύελα, βρογχικά υγρά έκπλυσης.
  • Στη συνέχεια, το βιολογικό υλικό εκτίθεται σε υψηλές θερμοκρασίες φτάνοντας έως και τους 97 βαθμούς Κελσίου για αρκετά λεπτά. Λόγω αυτού, η αρχική δομή του DNA του παθογόνου, που αποτελείται από ένα ζεύγος αλυσίδων, καταστρέφεται (μετουσίωση).
  • Το επόμενο στάδιο είναι η ανόπτηση, κατά την οποία η θερμοκρασία μειώνεται για να επιτρέψει στο αστάρι να συνδεθεί με έναν από τους κλώνους DNA που αποσυνδέθηκαν κατά τη διάρκεια της προηγούμενης διαδικασίας.
  • Το τελικό στάδιο είναι η επιμήκυνση, κατά την οποία διεξάγεται η βιολογική σύνθεση των απαραίτητων μορίων.

Χρειάζονται περίπου 25-30 κύκλοι για να ληφθεί ο απαιτούμενος αριθμός αντιγράφων του DNA του παθογόνου, το οποίο μπορεί ήδη να ταξινομηθεί ανάλογα με το αν ανήκει σε ένα συγκεκριμένο στέλεχος. Για την πραγματοποίηση της έρευνας μέσω της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης απαιτείται ειδικός ακριβός εξοπλισμός. Η εγκατάσταση τέτοιων συσκευών δεν είναι πάντοτε δυνατή.

Ως εκ τούτου, οι αναλύσεις PCR για υποψία φυματίωσης δεν μπορούν να χαρακτηριστούν ως οι πιο προσιτές σε οικονομικά μεγέθη. Αλλά σε ορισμένες περιπτώσεις, όταν κάθε λεπτό είναι ακριβό, λόγω ηλικίας ή κάποιων ιδιοτήτων του σώματος, αντενδείκνυνται άλλες μέθοδοι διάγνωσης, η ανάλυση PCR δεν είναι ίση, καθώς είναι απολύτως ασφαλής. Η διάγνωση της PCR σε φυματιώδη παθολογία ανατίθεται σε περίπτωση αμφιλεγόμενης κατάστασης, εάν δεν υπάρχει σαφής κλινική εικόνα και άλλες μέθοδοι έρευνας παρουσιάζουν αντικρουόμενα αποτελέσματα.

Αποτελεσματικά, μια παρόμοια εξέταση του αίματος ή άλλων βιολογικών υγρών στην υποτροπή της φυματίωσης.

Εκτός από την απουσία ή την παρουσία ενός στελέχους μίας συγκεκριμένης φυματίωσης μυκοβακτηριδίου. Με τη βοήθεια αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης, είναι δυνατόν να προσδιοριστεί σε ποιο στάδιο βρίσκεται η ασθένεια. Ωστόσο, είναι απαραίτητο να ληφθεί υπόψη ότι αν η ανάλυση PCR διεξάγεται σε άτομα που έχουν υποβληθεί σε θεραπεία για βλάβες φυματίωσης. Στη συνέχεια, στο αίμα και σε άλλα δείγματα μπορεί να υπάρξει μικρός αριθμός θανάτων ή ακόμη και στο στάδιο της θανάτωσης μυκοβακτηριδίων φυματίωσης και η απάντηση μπορεί να είναι ψευδώς θετική.

Η ανάλυση PCR για την ανίχνευση μόλυνσης από φυματίωση είναι μια μερική λύση στο πρόβλημα, εκτός από τον μαζικό εμβολιασμό, στην καταπολέμηση των θανατηφόρων περιστατικών στην περίπτωση της φυματίωσης. Τώρα, δεν υπάρχει λόγος να περιμένουμε την εκδήλωση εύγλωσσων συμπτωμάτων ή την εμφάνιση φώκιας εξειδικευμένης στη φυματίωση στην εικόνα μετά από φθοριογραφία. Με κάθε υποψία πιθανής μόλυνσης, προκειμένου να εξαλειφθούν τελείως οι επιζήμιες συνέπειες, υπάρχει πάντα η δυνατότητα διεξαγωγής ανάλυσης για PCR.